اساسي پیژندنه
ایریتروسیټ لیسټیټ د وینې سره د سرو حجرو د لرې کولو لپاره یو له خورا ساده او اسانه میتودونو څخه دی، دا د لیسټیټ سره د سره وینې حجرې ویشل دي، کوم چې نیوکلیټ حجرو ته زیان نه رسوي او کولی شي په بشپړه توګه د وینې سره حجرې لرې کړي. Lysate cleavage د وینې سره د سرو حجرو د لرې کولو یوه معتدله طریقه ده، چې په عمده توګه د انزایمونو د هضم په واسطه د نسج حجرو د جلا کولو او پاکولو، د لیمفوسایټونو جلا کولو او پاکولو، او د نسج پروټین او نیوکلیک تجربو کې د وینې د سرو حجرو لرې کولو لپاره کارول کیږي. اسید استخراج. د نسجونو حجرې چې د وینې د سرو حجرو د لیسیټ لخوا ترلاسه کیږي د وینې سره سره حجرې نلري، او نور د ابتدايي کلتور، د حجرو فیوژن، فلو سایټومیټري، د نیوکلیک اسید او پروټین جلا کولو او استخراج لپاره کارول کیدی شي.
د کارولو لپاره لارښوونې
د نسج حجرو نمونه
1. تازه نسجونه د پانقراس/انزایم یا کولیګینیز لخوا هضم شوي او د واحد حجرو تعلیق کې توزیع شوي، او سپرناټینټ د سینټرفیوګریشن په واسطه رد شوي.
2. ELS lysate له یخچال څخه په 4- کې واخلئ، د 1:3-5 په تناسب د حجرو پروسیپیټیټ کې ELS lysate اضافه کړئ (د 3-5ml lysate 1ml حجرو ته اضافه کړئ)، په نرمۍ سره ووهئ او مخلوط کړئ.
3. په 800-1000rpm کې د 5-8 دقیقو لپاره سینټرفیوج کړئ او پورتنۍ سور روښانه مایع پریږدئ.
4. د اورښت وړ برخه د هانک محلول یا د سیروم څخه پاک کلتور محلول سره د 2-3 ځله لپاره راټول او سینټرفیوګ شوې.
5، که چیرې کریک کول بشپړ نه وي/بشپړ شي د 2 او 3 مرحلې تکرار کیدی شي.
6. د راتلونکو تجربو لپاره د بیا پیل کولو حجرې؛ که چیرې RNA استخراج شي، نو دا غوره ده چې دا د DEPC اوبو په کارولو سره د 4 مرحلې څخه چمتو شوي محلول کې ترسره کړئ.
د وینې سره حجرې خورا لنډ ژوند دوره لري، یوازې 120 ورځې، مګر دوی په چټکۍ سره وینه تولیدوي، او پدې حالت کې دوی په ځانګړې توګه د حجرو ویشلو توان لري، او دوی د ټولو ګړندۍ ویشلو حجرې دي، نو دا حجره خورا ارزښتناکه ده، نو دا د حجرو کلتور لپاره خورا ګټور دی. دا خورا ساده دی، په دې کې هیڅ ارګانیل نشته، یوازې د حجرو غشا او پروټینونه.